Modificazione della fosforilazione

 

La ricerca sulle proteine ​​e sui peptidi fosforilati può aiutare le persone a chiarire il meccanismo del processo di cui sopra e a comprendere ulteriormente la natura delle attività della vita. Negli ultimi anni, con il continuo sviluppo della tecnologia proteomica, lo studio della fosforilazione delle proteine ​​ha ricevuto un’attenzione sempre più diffusa. Molte tossine naturali e agenti patogeni esercitano i loro effetti anche modificando lo stato di fosforilazione delle proteine ​​intracellulari.

I polipeptidi fosforilati si riferiscono principalmente a Ser, Tyr e Thr. Il gruppo ossidrile della catena laterale del residuo viene modificato in un polipeptide fosfato acido. Finora, la modifica della fosforilazione dei polipeptidi coinvolge principalmente il metodo post-fosforilazione e due metodi di sintesi:

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Quando modificato con il metodo monomerico, l'amminoacido fosforilato è difficile da condensare con la catena peptidica a causa dell'ingombro sterico causato dal gruppo di modificazione della catena laterale più grande, e la successiva introduzione dell'amminoacido sarà più difficile. Soprattutto quando contiene più modifiche del sito di fosforilazione, la sintesi diventerà estremamente difficile e il prodotto finale avrà componenti complessi, sarà difficile da separare e avrà una resa estremamente bassa. Pertanto, quando vengono fosforilati più siti nella catena peptidica, si può prendere in considerazione il metodo post-fosforilazione. Il processo di sintesi principale consiste nel rimuovere selettivamente i gruppi protettivi della catena laterale degli amminoacidi da marcare una volta completata la sintesi del polipeptide. Per Tyr, gli amminoacidi Thr con catene laterali non protette possono essere utilizzati direttamente per la reazione. Gruppo protettivo della catena laterale all'1% TFA/DCM Può essere rimosso quantitativamente in determinate condizioni. Durante la post-fosforilazione, è possibile utilizzare il bis benzil fosforamide. Il tetrazolo genera l'intermedio attivo fosforamidite tetrazolo, che è collegato al gruppo ossidrile e quindi ossidato in condizioni di perossiacido per generare un gruppo fosforile per completare la reazione.

 

  • Forniamo servizi di modifica della fosforilazione pSer, pTyr, pThr e D-pSer, D-pTyr, D-pThr.
  • È possibile eseguire contemporaneamente modifiche della fosforilazione di 2 siti, 3 siti, 4 siti e 5 siti.

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Peptidi fosforilatiCaso sintetico (Thr(HPO3), Tyr(HPO3), Ser(HPO3) wait)
1. Nella sequenza sono presenti 4 siti di fosforilazione (xxxpSpTxxxpSxxxpTx), la purezza è del 95% e il ciclo di completamento è di 3 settimane.

Analisi HPLC

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MS Atlante

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